Привет, Человек! Меня зовут Диджи – я открою тебе дверь в мир волшебства!
Сегодня мы поговорим о самом первом этапе грова, с которого начинается опыт каждого шрумера!
По сути, в нем нет ничего сложного, но каждый человек волнуется, делая это впервые - именно для тебя тут будет понятная инструкция и комментарии! ;)
Что такое споровая взвесь?
Это стерильная вода, в которой споры грибов проходят гидратацию (регидрацию). Она является инструментом для транспортировки спор на стерильный субстрат.
Зачем делать споровую взвесь?
Обратимся за ответом к природе, ведь весь процесс гровинга — это симуляция природных условий.
После раскрытия шляпок гриб начинает разбрасывать споры. Такие свежие споры полностью готовы к прорастанию, они содержат в себе достаточно влаги. Но спустя короткое время они обезвоживаются и клеточные стенки спор сворачиваются к центру. Так они переходят в состояние покоя на период засухи и ожидают сезона дождей...
Для того чтобы воспроизвести сезон дождей, тем самым пробудив и подготовив споры к росту, мы помещаем их в стерильную воду в шприце.Кроме того, споровая взвесь является самым простым и доступным методом инокуляции субстрата для начинающих культиваторов!
Нам понадобится:
- Споровый отпечаток в зип-пакете. В идеале нужен стерильный споровый отпечаток. Забегая немного наперёд отмечу, что если есть сомнения в стерильности отпечатка, то за 20 минут до инокуляции я рекомендую добавлять антибиотик (гентамицин или левомицетин) во взвесь. Если же отпечаток стерильный, то антибиотик не понадобится. Детальный процесс и условия добавления антибиотика во взвесь мы рассмотрим в разделе Инокуляция.
- Стерильный шприц. Один шприц на один споровый отпечаток. Объем шприца минимум 5 мл. Если использовать шприцы средних и больших объемов на 10-20-30 мл, тогда ты сможешь разбавить споровую взвесь и получить больше материала для инокуляции. Ниже я расскажу как это сделать.
- Ампула с водой для инъекций минимум 5 мл. Одна ампула на один споровый отпечаток. Если будешь разбавлять взвесь, то понадобится дополнительная вода для инъекций. Еще 5-15-25 мл для шприцев объёмом 10-20-30 мл соответственно. Если работы предстоит много - рекомендую купить сразу флакон 0.5л
- Обычный кухонный нож
- Спирт этиловый 70%-ный.
Некоторые гроверы используют антисептики или хлоргексидин в качестве замены спирта. Кто-то использует даже водку или самогон. Однако спирт испаряется быстрее и не оставляет лишней воды. Любую замену спирту я не рекомендую. Я использую исключительно 70%-ный раствор этилового спирта без каких-либо примесей и добавок. Можно использовать 96%-ный. Но на самом деле 70%-ный даже надежнее, потому что с бОльшим содержанием воды в растворе он лучше проникает через мембраны бактерий, в то же время достаточно быстро испаряется.
- Экипировка гровера: перчатки, маска, шапочка, халат/дождевик.
- Ватные диски — 2-3 шт.
- Зажигалка (или сухое горючее)
Предварительная подготовка:
- Надень на себя экипировку гровера: маска, шапочка, перчатки, медицинский халат (или полиэтиленовый дождевик).
- Обработай стол спиртом. Можно протереть стол ватным диском смоченным спиртом или нанести спирт на стол с распылителя и протереть ватным диском. Я использую спирт в виде спрея - так удобнее.
- Обработай спиртом перчатки, хорошо протри руки по всей поверхности перчаток.
- Обработай спиртом рукава халата (или дождевика) до локтя.
- Протри спиртом все, что у тебя есть на рабочем столе: ампулу с водой для инъекций, зип-пакет со споровым отпечатком, нож для ампулы, упаковку шприца и даже сам флакон со спиртом.
- Спирт не жалей!
- Если имеется бактерицидная УФ лампа используй ее за 30 минут до манипуляций, разложив весь инструмент на столе (НО НЕ ОБЛУЧАЙ САМ ОТПЕЧАТОК!!!)
Пошаговое приготовление:
Во время подготовки взвеси не нависай над рабочим столом всем телом. Старайся, чтобы над столом были только твои ладони и кисти рук.
- Открой ампулу с водой для инъекций.
- Вскрой шприц со стороны ручки, надень на него иглу не вынимая целиком из упаковки. Сними колпачок с иглы и наполни шприц водой для инъекций, из ампулы. Не набирай воздух! Затем, закрой иглу колпачком.
- Зип-пакет со споровым отпечатком не открывай! Протри его спиртом еще раз.
- Проткни зип-пакет иглой шприца чуть выше отпечатка. Выдави воду со шприца в зип-пакет (не всю!)
- Не вытаскивая иглу из зип-пакета, одной рукой зажми место прокола с иглой, а другой потри сквозь зип-пакет сам носитель со спорами, чтобы споры отделились и смешались с водой.
- Втяни шприцем воду со спорами. (если с 1го раза спор собралось мало, повтори вливание-всасывание еще 1-2 раза. Но не жадничай - в приоритете время, а не кол-во спор)
- Вытащи иглу из зип-пакета и раскали кончик над зажигалкой докрасна. Надень на иглу шприца защитный колпачок. Следи, чтобы открытая игла ни к чему не прикасалась (Не клади шприц на стол без защитного колпачка!).
- Потруси шприц, чтобы споры перемешать с водой и оберни его фольгой для обеспечения условий темного места.
- Подпиши штамм (сорт).
Оставь готовую споровую взвесь для регидрации на 24 часа при комнатной температуре (+20+25°С).Если споровый отпечаток хранился 2 года и более, то понадобится более длительная регидрация спор. Каждый год хранения увеличивает длительность регидрации на 1 сутки. 2 года хранения — 2 суток регидрации, 3 года — 3 суток регидрации и т.д. А можно просто оставить их в воде на неделю. Хранить взвесь во время длительной гидратации следует в холодильнике при +2°..+8°С.
Как получить бОльший объем взвеси?:
Наилучшим вариантом, будет понимание, сколько тебе нужно инокулировать банок, ДО ТОГО, как ты будешь делать взвесь. Так ты можешь сразу взять шприц нужного объема и не заниматься переливаниями, которые несут доп. риски заражения.
Приготовленную споровую взвесь ты можешь разбавить, тем самым увеличив объём сырья для инокуляции в несколько раз. Более того, разбавление взвеси даже рекомендуется! Ведь каждый споровый отпечаток содержит миллионы спор. Разбавив взвесь, ты сможешь засеять больше банок с субстратом или даже разделить споровую взвесь на несколько попыток. Ведь необязательно использовать всю взвесь сразу. Так ты сможешь увеличить свои шансы на успех и сэкономить ресурс своего спорового отпечатка. Бывает, начинающим гроверам он достается не так уж легко, быстро и дешево.
Чтобы разбавление было максимально стерильным и исключить контакты споровой взвеси с другими сосудами и воздухом. Можно из шприца со спорами переливать буквально 1 мл взвеси в другой шприц, заполнять оставшийся объем шприца водой и таким образом разбавлять. После всех проделанных манипуляций со споровым отпечатком в зип-пакете просто добавь к имеющимся 5-10 мл воды со спорами еще 10-20 мл стерильной воды для инъекций — сколько позволит объем твоего шприца.Как я уже говорил ранее, ты можешь использовать лишь часть взвеси для инокуляции. Например, инокулировать 5-10 мл, а оставшиеся 5-10-20 мл в шприце оставить для следующего раза. Если у тебя уже есть взвесь в шприце на 5 мл, то ты можешь инокулировать 3 мл, а в оставшиеся 2 мл добавить еще 3 мл стерильной воды для инъекций. Разбавлять взвесь можно до тех пор, пока раствор не станет слегка окрашен спорами.
Использование антибиотиков:
Я не рекомендую их использовать, поскольку это в любом случае влияет на колличество живых спор и их генетику. Мицелий, растущий из обработанных спор, может мутировать и, к примеру, развиваться, но не давать плодовых тел (грибов). Чтобы отказаться от использования антибиотиков, тебе нужно использовать отпечатки, полученные стерильным образом (в домашних условиях добиться этого практически невозможно). Для этого, рекомендую покупать споровый материал только у проверенных поставщиков, которые снимают споровый материал в лабораториях. (это не самореклама, если что. Заказывай где хочешь)
Если используешь антибиотик, то за 20-30 минут до инокуляции следует добавить его в неразбавленную взвесь. Затем взвесь с антибиотиком разбавить и приступать к инокуляции. Тогда можно будет сэкономить на антибиотике, а разбавленную взвесь с разбавленным антибиотиком можно положить в холодильник на хранение. Так концентрация антибиотика будет не столь опасной для самых выносливых спор.
Расход антибиотика составляет 1 мл на 10 мл взвеси. Если разбавишь взвесь сразу, то соответственно придется увеличить расход антибиотика: 2 мл на 20 мл взвеси и 3 мл на 30 мл взвеси. Использовать взвесь с антибиотиком в такой концентрации желательно в течение 20-30 минут.
Что делать если уже добавил антибиотик во взвесь, а планируешь использовать ее не всю? - после инокуляции разбавь взвесь с антибиотиком стерильной водой для инъекций. Так ты снизишь концентрацию антибиотика и самые крепкие споры останутся в живых.Если у тебя стерильный споровый отпечаток, то антибиотик не нужен! В таком случае не имеет значения, когда разбавлять взвесь. Можешь сразу, а можешь непосредственно перед инокуляцией.
Длительность хранения взвеси:
Споры в жидкой споровой взвеси сохраняют свою жизнеспособность до 1 года. Зафиксированы случаи и более длительного хранения и гровинг был успешный.Хранить взвесь следует в темном месте. Лучше обернуть шприц фольгой и положить в зип-пакет.Температура хранения — при +2°..+8°С в холодильнике. Взвесь периодически рекомендуется взбалтывать в течение всего периода хранения.Перед использованием следует тщательно взболтать шприц, так как споры со временем могут склеиваться.Проверь шприц на наличие какой-либо подозрительной слизи или новообразований, которые отличаются от сиренево-коричнево-черных спор. Взвесь должна быть прозрачной и однородной.
P.S. На этом статья о первом шаге, на удивительном пути, подошла к концу! Я надеюсь, новичкам она была полезной и буду рад ответить на возникающие вопросы! ;)